بیان پروکاریوتی پروتئین کایمر سه تایی3M2e-HA2-NP حاصل از نواحی حفاظت شده پروتئینهای ویروس آنفلوانزای A/H1N1 در راستای دست یابی به واکسن زیر واحدی فراگیر

Authors

  • حاتمی, شکوفه بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
  • شکوفی, حدیث بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
  • صالحی, مریم بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
  • فتوحی, فاطمه بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
  • فرهمند, بهرخ بخش آنفلوانزا و سایر ویروس های تنفسی انستیتو پاستور ایران
  • ناظری, الهه بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
  • هاشمی, مهرداد گروه علوم نوین، واحد علوم پزشکی تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
Abstract:

زمینه و هدف: ویروس آنفلوانزا A یک پاتوژن تنفسی مهم است که باعث بیماری و مرگ و میر گسترده در طول اپیدمی‌های فصلی و پاندمی ‌ها می‌شود. واکسن‌های رایج آنفلوانزا توانایی ایجاد ایمنی مؤثر در برابر سویه‌های مختلف ویروس آنفلوانزا را ندارند. طراحی واکسن‌های فراگیر با استفاده از آنتی‌ژن‌های حفاظت شده‌ی ویروس آنفلوانزا در جهت رفع این محدودیت می‌باشد. ناحیه بیرونی پروتئین M2 آنفلوانزا (M2e)، ساقه هماگلوتینین (HA2) و نوکلئوپروتئین (NP) بخشهای‌ بسیار حفاظت شده در میان زیرگونه‌های مختلف ویروس آنفلوانزا A هستند. هدف این مطالعه، افزودن بخشی از ژن NP به سازه‌ی دوتایی 3M2e-HA2  و بیان کایمر سه تایی در سیستم پروکاریوتی بود. این پروتئین نوترکیب کاندید آنتی‌ژنی نوید بخشی برای تولید واکسن فراگیر محسوب می‌شود. روش بررسی: ابتدا بخشی از ‌ژن NP ویروس آنفلوانزای انسانی سویه  A/H1N1(PR/8/34) با روش PCR و با استفاده از پرایمر‌های اختصاصی طراحی شده تکثیر شد. ژن تکثیر شده در وکتور کلونینگ pGEM-TEasy کلون شد. سپس ژن NP تایید شده در وکتور بیانی نوترکیب pET28a-3M2e-HA2 در پایین دست قطعه‌ی HA2 کلون شد. پس از تایید کلونینگ، پروتئین کایمر در باکتری E.coli سویه BL21(DE3) بیان شد. یافته‌ها: نتایج Colony PCR، هضم آنزیمی و تعیین ترادف نشان دادند که قطعه انتخابی ژن NP در وکتور نوترکیب pET28a-3M2e-HA2 به درستی جایسازی شده است. بیان پروتئین کایمرتوسط SDS-PAGE بررسی و با آزمایش وسترن بلات تایید شد. استنتاج: طراحی و تولید پروتئین نوترکیب 3M2e-HA2-NP می‌تواند گام مهمی درجهت تولید واکسن فراگیر به منظور مقابله با زیرگونه‌های مختلف ویروس آنفلوانزا باشد. واژه های کلیدی: واکسن آنفلوانزا، پروتئین کایمر، 3M2e، HA2، NP وصول مقاله:18/11/95 اصلاحیه نهایی:27/3/96 پذیرش:21/5/96

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بیان و خالص سازی پروتئین کایمر نوترکیب (3M2e-HA2) واجد نواحی حفاظت شده هماگلوتینین و پروتئین ماتریکس ویروس آنفلوانزا در راستای تولید واکسن زیرواحدی جهانی

Background and purpose: Influenza virus is one of the most important respiratory infectious agents. Viral antigenic variations are major problems for vaccine production process. At present, many researches have focused on conserved domains of influenza virus antigenic peptides for subunit vaccine development. Hemagglutinin small subunit (HA2) and the 23 amino acid extracellular N-terminal domai...

full text

بیان و خالص سازی پروتئین کایمر نوترکیب (۳m۲e-ha۲) واجد نواحی حفاظت شده هماگلوتینین و پروتئین ماتریکس ویروس آنفلوانزا در راستای تولید واکسن زیرواحدی جهانی

سابقه و هدف: ویروس آنفلوانزا یکی از مهم‏ترین عوامل عفونی در سراسر جهان است که تغییرات آنتی‏ژنیک آن چالش بزرگی در مسیر تولید واکسن می‏باشد. در حال حاضر اکثر پژوهش‏ها بر روی توسعه واکسن‏های زیرواحدی حاصل از پپتیدهای آنتی‏ژنیک حفاظت شده ویروس متمرکز شده است. زیر واحد کوچک مولکول هماگلوتینین (ha2) و بخش آمینی خارج سلولی پروتئین کانال یونی (m2e) با 23 اسید آمینه، در همه ویروس‏های آنفلوانزای a انسانی...

full text

کلونینگ و بیان پروتئین tat ویروس hiv1 در سیستم پروکاریوتی

ژن tat hiv-1 پروتئینی kda16-14 را کد می کند و همانطور که از نام آن پیداست فعال کننده اصلی در رونویسی hiv1 است. پروتئین tat حاوی 101 اسید آمینه است که توسط 2 اگزون کد می شود و در مراحل اولیه عفونت ویروسی بیان می شود. tatیک پروتئین متصل شونده به rna است که رونویسی را در سطح طویل سازی rna تنظیم می کندبرای این منظور ، یک پلاسمید حاوی ژن tat (puc57-tat) ساخته شد. سپس ژنtat توسط آنزیم های xho1 و ncoi...

کلونینگ و بیان ژن np ویروس آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ h9n2 در اشرشیاکلی

خلاصه فارسی: خلاصه فارسی: آنفلوانزای پرندگان یک بیماری عفونی خطرناک و با اهمیت جهانی است که خسارات مالی قابل توجهی به صنعت طیور تحمیل می کند. ویروس آنفلوانزای پرندگان از جنس آنفلوانزاویروس a و از خانواده ارتومیکسوویریده می باشد. یک برنامه مراقبتی مناسب مانند جستجوی سرولوژیکی آنتی بادی های تولید شده بر ضد ویروس آنفلوانزای پرندگان، اهمیت زیادی در پیشگیری و کنترل آنفلوانزای پرندگان دارد. تشخیص س...

15 صفحه اول

کلون، امتزاج و بیان نوترکیب ناحیه 4 آنتی‌ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با زیرواحد B کلرا توکسین در باکتری اشرشیاکلی

زمینه و هدف: ترکیب یا اتصال ژنتیکی آنتی ژن ها با زیر واحد B کلرا توکسین =cholera toxin B) (ctB پاسخ آنتی‌بادی موکوسی قوی ای را ایجاد می‌کند. هدف از این مطالعه اتصال ctB به ژن کد کننده ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده (Protective antigen Domain 4=PaD4) به منظور بیان پروتئین کایمریک به عنوان کاندیدا واکسن علیه بیماری سیاه زخم می باشد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی واکنش PCR با پرایمرهای ا...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 22  issue 5

pages  111- 120

publication date 2017-11

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023